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    PanaceaGel 3D细胞培养常见问题
    浏览次数:2135 发布日期:2015-05-11

    1 问:PanaceaGel是什么?

    答:PanaceaGel是化学合成的肽水凝胶,PH为中性。该凝胶为透明、生物可降解、3D网络支架,不包含任何生物来源的成分,小瓶盛装。

     

    2 问:PanaceaGel是什么材质的?

    答:PanaceaGel100%是由13个天然氨基酸化学合成的肽。原子力显微镜(AFM)和亚博娱乐下载地址(SEM,TEM)观察也发现,水溶液中小肽根据天然3D网状结构自发组装成纳米纤维。由合成肽和碳酸钠调节水凝胶PH值,约8.5%的海藻糖作为等渗试剂调节渗透压。

    3 问:PanaceaGel刚性如何?

    答:随着肽浓度和混合物中盐浓度变化,PanaceaGel刚性不断变化。培养细胞分泌的细胞外基质也会影响其机械强度。例如流变学测量显示,以2:1的比例混合PanaceaGel0.4%)和DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium),储能模量(G’)和损耗模量(G’’)分别为97.0 ± 2.1 Pa 15.3 ± 1.4 Pa

    4 问:PanaceaGel需要灭菌么?

    答:发货前PanaceaGel已经经过高压灭菌。无需进一步灭菌。

     

    5 问:如何储存PanaceaGel

    答:PanaceaGel需在4-25℃避光保存。

     

    6 问:室温条件下PanaceaGel稳定性如何?

    答:未开封的PanaceaGel4-25℃时保存在黑暗处能放置6个月。长期稳定性研究正在进行中。

     

    7 问:PanaceaGel应用于细胞悬液时需进行任何预处理么?

    答:不需要。PanaceaGelPH为中性,所以用于细胞悬液时无需再平衡。二者极易混合,但液体混合时一定要迅速,因为PanaceaGel只要暴露于培养基中的盐中流动性就会大大降低。

    8 问:PanaceaGel能用于何种细胞?

    答:已经使用PanaceaGel成功培养了以下细胞:

    小鼠骨骼肌细胞(C2C12)

    大鼠骨骼肌细胞(L6)

    小鼠成纤维细胞(NIH3T3)

    人成纤维细胞(TIG-1)

    人软骨肉瘤细胞(OUMS-27)

    新生的心肌细胞(直接分离得到)

     

    9 问:PanaceaGel和其他细胞三维培养材料有何异同?

    答:参考下表

     

    PanaceaGel

    胶原Collagen

    生物可降解聚合物


    Biodegradable polymer

    来源

    合成

    动物源性

    合成

    刚性

    中等

    中等


    PH

    中性

    中性、酸性

    中性

    生物亲和性

    良好

    极佳

    良好

    透明度




     

    10 问:实验中如何选择PanaceaGel使用浓度?

    答:有两种浓度的PanaceaGel,分别为0.4%0.8%。初始实验,推荐将0.4%PanaceaGel和细胞悬液以1:1的比例等体积混合,获取PanaceaGel终浓度为0.2%0.8%PanaceaGel能用于制作更高硬度的水凝胶。根据细胞类型不同,PanaceaGel和细胞的最佳密度也不同。

    11 问:在PanaceaGel中如何培养细胞?

    答:参考试验步骤。

    12 问:使用PanaceaGel时需要特殊装置么?

    答:不需要

    13 问:最佳生长条件和限制是什么?

    答:细胞终浓度为1051×106cells/mL,对大多数类型细胞都可以选择普通培养基。PanaceaGel 3D培养细胞厚度不超过2mm

    14 : PanaceaGel用过的细胞能再次培养么?

    答:可以。破坏支架后通过移液能释放细胞并再次培养。

    15 问:如何将生物活性物质整合到PanaceaGel中(小肽,生长因子等)?

    答:生物活性物质能添加到培养基或细胞悬液中。如果加入培养基中,生物活性物质必须在30分钟内浸润并抵达细胞。若添加到细胞悬液中,需保持生物活性物质最适浓度。

    16 问:能否在PanaceaGel表面培养细胞?

    答:可以。添加细胞悬液前,PanaceaGel能包被培养皿、插件、孔板或其他细胞培养盘。加入细胞悬液时操作要轻柔,避免搅动。

    17 问:PanaceaGel 3-D培养的细胞下游分析有哪些?

    答:我们已成功进行过以下实验:

    -DAPI PI或钙黄绿素染细胞测免疫活性

    -亚博体育官方在线试剂染色后进行DNA 计数

    -Western blot分析

    -免疫染色

    -SEM

    -TEM

    18 问:PanaceaGel3D 培养的细胞能移植到体内进行分析么?
    答:满载细胞的PanaceaGel能植入活体动物组织中,进行专门活体研究。PanaceaGel本身是生物可降解的,体外研究中表明无毒性。

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